产品说明

• 帽子结构是指在真核生物中转录后修饰形成的成熟mRNA在5'端的一个特殊结构，是在RNA三磷酸酶，mRNA鸟苷酰转移酶，mRNA甲基转移酶催化下形成。该结构对 mRNA 的稳定性、转运及翻译过程均有重要作用，是mRNA在体内发挥生物学功能必不可少的元件。
• 本品是一种经过基因工程改造的重组mRNA加帽酶，分子量约99KDa，同时具备RNA 三磷酸酯酶、鸟苷酰基转移酶和鸟嘌呤甲基转移酶三种酶活性，在合适浓度的加帽缓冲液（Capping buffer），鸟苷三磷酸（GTP），S－腺苷甲硫氨酸（SAM）等条件下，可在一个小时之内完成 mRNA 加帽，在mRNA 的 5'末端形成Cap0 帽子结构，如与二氧甲基转移酶共同使用，可进一步形成Cap1 帽子结构。
• 本品按照 GMP要求生产，产品以无菌液体形式提供，可应用于mRNA 的加帽反应或 mRNA 的5'末端标记反应。

产品包装

活性定义

在37℃、pH8.0的条件下，30分钟内将75 pmol的20nt RNA转化为Cap-0 RNA所需的酶量定义为1个活性单位。

保存体系

保存温度：-20℃，或-80℃长期保存。

注意事项 

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；实验操作需要注意全程保持无RNA酶环境，防止RNA降解。 
2. 所提取的 RNA 需经过纯化并使用无核酸酶水溶解； 
3. 在加帽反应前需进行 RNA变性 以去除 5'末端的二级结构； 
4. 对于已知 5'末端结构的 RNA，可延长反应时间至 60 分钟，以提高加帽率； 
5. 为增强RNA的稳定性，可在反应体系中额外添加RNA酶抑制剂（终浓度为1U/μl）。
6. SAM在pH7~8、37℃环境下稳定性较差，加入反应体系前需要保持在冰上。

参考反应体系（20μl）

37℃反应30分钟